造血細胞超低溫保存箱

  造血細胞的保存始于20世紀20年代末80年代初，短期保存是在4度下進行。在這種溫度下，離體細胞仍然保持著新陳代謝，通常只能保存48～72 h。而超低溫(零下80～零下196度)時，細胞內新陳代謝減慢乃至停止，則可以較長時間保存。細胞的超低溫保存在降溫和復溫過程中，其內外環境會發生一系列改變，會造成冷凍損傷，而加人細胞保護劑可減輕這種損傷，細胞復溫后可以維持初始形狀和生理功能。細胞保護劑一般分為高分子的非穿透性保 護劑 (如HES、白蛋白等)和低分子的穿透性保護劑 (如 DMSO、甘油等)。造血細胞的保存初期多用10%DMSO為保護劑的程控降溫液氮液態保存，保存的骨髓細胞15年后造血細胞活力良好。程控降溫是基于造血細胞為有核細胞，在細胞溫度進人液氮內溫度前，需以1～2℃／rain降溫速率降溫至-60度或-80度。這種降溫方法需特殊程控降溫儀，不僅操作費時，且成本大，特別是對小樣本的保存是很不經濟的，因此限制了它的使用。我們在20世紀80年代，采用10%的DMSO為保護劑，-80度低溫冰箱降溫保存骨髓 。

  研究表明，從保護劑的角度看，5%DMSO-6 %HES優于10%DMSO。這一效果在用低溫保存箱?降溫與保存中更能得到充分體現。這可能與DM-SO對細胞有毒性作用有關。有學者報道，即使在4度下，骨髓細胞接觸5 rain的10%DMSO后，CFU-GM將損失25%，30min后損失可超過75%。我們的結果顯示，這種損傷現象沒有那么嚴重，但5%DMSG-6%HES明顯減輕了這種損傷。

  低溫保存箱降溫液氮保存和低溫保存箱降溫并保存，與自控程序降溫液氮保存比，在1年內造血細胞保存效果均良好。本研究20例患者的外周血干細胞在1年內均已進行了移植，全部重建造血功能 。另有文獻報道，如果造血細胞需要長期保存，選用低溫保存箱降溫時，則以液氮保存為好，也說明-80度的低溫保存箱降溫能達到慢速降溫的效果。細胞在這種溫度下不宜長期存放，是否說明細胞在此溫度下仍保持一定程度的新陳代謝，值得進一步研究。 細胞的低溫保存是在液氮液態下保存還是在液氮氣態下保存仍有爭論，過去多是推薦液氮液態保存，現主張在液氮氣態下保存。細胞復溫后，細胞內保護劑也應立即稀釋或去除，如果細胞是給患者治療用，細胞復溫后應立即應用，在 30rain內輸人體內。

文章原創:上海拓紛制冷設備有限公司 www.tfzhileng。。ｃｏｍ  www.toffon。。ｃｎ