-86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應用

   隨著超低溫冰箱技術的不斷發展，超低溫冰箱在醫用領域也逐漸被廣泛應用。例如-86℃低溫冰箱在冰凍切片上的應用，那就是冰凍切片環節中速凍，以減少冰晶形成。

    免疫組織化學染色中zui常用的一種切片方法，就是冰凍切片。它zui突出的優點，就是能夠較完好地保存多種抗原的免疫活性，尤其是細胞表面抗原，更應采用冰凍切片。新鮮的組織及已固定的組織均可作冰凍切片。冰凍時，組織中水份易形成冰晶，往往影響抗原定位。一般認為冰晶少而大時，影響較小，冰晶小而多時，對組織結構損害較大，在含水量較多的組織中上述現象更易發生。冰晶的大小與其生長速率成正比，而與成核率（形成速率）成反比，即冰晶形成的數量愈多則愈小，對組織結構影響愈嚴重。因此，應盡量降低冰晶的數量。Fish認為冰凍開始時，冰晶成核率較慢，以后逐漸增加，其臨界溫度為-33℃，從-30℃降至-43℃之間，成核率急劇增加達1018，然后再減慢。基于上述理論可采取以下措施減少冰晶的形成。

（1）速凍，使組織溫度驟降，縮短從-33℃到-43℃的時間，減少冰晶的形成。

其方法有二：

①干冰-丙酮（酒精）法：將150-200ml丙酮（酒精）裝入小保溫杯內，逐漸加入干冰，直至飽和呈粘稠狀，再加干冰不再昌泡時，溫度可達-70℃，用一小燒杯（50-100ml）內裝異戊烷約50ml，再將燒杯緩慢置入干冰丙酮（純酒精）飽和液內，至異戊烷溫度達-70℃時即可使用。將組織（大小為1cm×0.8cm×0.5cm）投入異戊烷內速凍30-60s后取出，或置恒冷箱內以備切片，或置-86℃低溫冰箱內貯存。

②液氮法：將組織塊平放于軟塑瓶蓋或特制小盒內（直徑約2cm），如組織塊小可適量加OCT包埋劑浸沒組織，然后將特制小盒緩緩平放入盛有液氮的小杯內，當盒底部接觸液氮時即開始氣化沸騰，此時小盒保持原位切勿浸入液氮中，大約10-20s組織即迅速冰結成塊。取出組織冰塊立即置入-86℃低溫冰箱貯存備用，或置入恒冷箱切片機冰凍切片。

-86℃低溫冰箱參數：

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